高效液相色谱作为一种高精度仪器，如果在使用中不以正确的方式操作，很容易导致一些棘手的小问题。最常见的问题之一是柱压问题。如何快速解决故障色谱仪。高效液相色谱仪系统主要由储液瓶、泵、进样器、柱、柱温箱、探测器和数据处理系统组成。对于整个系统来说，柱子、泵和探测器是关键部件，也是容易出现问题的主要位置。

柱压的关键是在使用高效液相色谱时需要密切关注的区域。柱压的稳定性与色谱图峰形、柱效、分离效果和保留时间密切相关。所谓柱压稳定性，并不意味着压力值稳定于稳定值，而是意味着压力波动范围在345kPa或50PSI之间（允许柱压稳定缓慢变化时使用梯度洗脱）。过高或过低的压力属于柱压问题。

1、高压是高效液相使用中最常见的问题。这意味着压力突然上升。一般来说，有以下原因：（1）一般来说，这是由于流道堵塞。此时，我们应该分段进行检查。a.首先，切断真空泵的入口。此时，PEEK管充满液体，使PEEK管小于溶剂瓶，以查看液体是否随意滴下。如果液体没有滴下或缓慢滴下，则溶剂过滤头堵塞。处理方法：用30%硝酸浸泡半小时，用超纯水冲洗干净。如果液体随意滴下，溶剂过滤头正常，正在检查；b.打开Purge阀，使流动相不通过柱子，如果压力没有明显降低，则过滤白头堵塞。处理方法：取出过滤白头，用10%异丙醇超声半小时。假设压力降至100PSI以下，过滤白头正常，正在检查；c.取出色谱柱的出口端，如果压力不降低，则是柱子堵塞。处理方法：如果是缓冲盐堵塞，则冲洗95%，直到压力正常。假使是一些保存较强的物质造成阻塞，则应使用比现在流动相更强的流动犯冲向正常压力。若按上述方法长期清洗压力不降低，则可考虑将柱子的进出口相反地连接到仪器上，用流动相清洗柱子。此时，如果柱压仍然没有降低，只能更换柱入口筛板，但一旦操作不好，很容易导致柱效降低，所以尽量少用。难以解决的问题可以考虑更换色谱柱。

(2)流速设置不正确：可以重新设置正确的流量。

（3）流动比不正确：不同比例的流动比粘度指数不同，粘度较高的流动对应的系统压力也较大。如果可能的话，可以更换粘度较低的溶剂或重新设置和准备。

(4)系统压力零点漂移：调整液位传感器的零点。

2、压力过低（1）通常是由于系统泄漏造成的。处理方法：找到每个连接处，特别是色谱柱两端的接口，拧紧泄漏区域。拆下柱子，用适当的力拧紧或衬里聚四氟乙烯薄膜。

（2）气体进入泵中，但此时压力通常不稳定，时高时低。更严重的是，泵将无法吸收液体。处理方法：打开purge阀，以3~5ml/min的流速清洁。如果没有，则使用专用针管在排气阀处吸出气泡。

(3)无流动相流出：检查储液瓶中是否有流动相，沉子是否浸入流动相，泵是否运转。

(4)参比阀未关闭：减速后关闭参比阀。一般降到0.1。～0.2mL/在min之后关闭参比阀。

总结：

本文只分析了液相色谱中常见的问题。当然，在我们的实际应用中，我们会遇到更多的其他问题。在故障处理中，我们应该遵循以下原则:一次只改变一个因素，以确定假设因素与问题的关系；一般在更换零件进行故障排除时，要注意将拆除的完好零件放回原位，防止浪费；养成良好的记录习惯是故障处理成功的关键。总之，在使用高效液相色谱时，一定要注意样品的预处理和设备的正确操作和维护。