替尔泊肽的合成主要采用 固相合成（SPPS） 与 液相合成（LPPS） 结合的策略，兼顾效率与纯度。

替尔泊肽化学结构式

基本信息

中文名称：替尔泊肽

英文名称：Tirzepatide

公司编号：GT-L007

CAS号：2023788-19-2

序列：H-Tyr-{Aib}-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-{Aib}-Leu-Asp-Lys-Ile-Ala-Gln-{diacid-C20-gamma-Glu-(AEEA)2-Lys}-Ala-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2

分子式：C225H348N48O68

分子量：4813.45

替尔泊肽COA

一、合成方法

替尔泊肽的合成主要采用 固相合成（SPPS） 与 液相合成（LPPS） 结合的策略，兼顾效率与纯度。

固相/液相联合合成法

礼来公司：礼来开发的葡萄糖依赖性促胰岛素多肽（GIP）受体和胰高血糖素样肽-1（GLP-1）受体的双重激动剂替尔泊肽，就是通过固相合成法合成多个短肽片段（AA1-14、AA15-21、AA22-29和AA30-39片段），如下图1所示。再通过液相合成方法将上述四个片段结合得到最终产物。而合成这些短肽片段的固相合成过程中，并非是一个一个氨基酸偶联完成，而是通过带有Fmoc或Boc保护的二肽或四肽进行偶联得到多个长片段。这样做可以减少氨基酸的使用量，同时减少杂质的生成，提高生产效率和产品质量。

替尔泊肽合成工艺路线

采用全保护肽段的分段合成策略，先固相合成全保护肽段（如1-17和18-39），再通过液相脱保护与偶联，显著缩短合成周期并提升收率。

固相合成法

使用 Rink酰胺树脂作为固相载体，逐步偶联氨基酸。例如，首先固定Fmoc-Ser(tBu)-OH，依次脱保护（哌啶/DMF）和偶联（HOBt/DIC活化羧基），直至完成目标序列。

固相合成法案例：合成结束后，用三氟乙酸（TFA）裂解树脂并去除侧链保护基，获得粗肽。

片段缩合与天然化学连接：针对长肽链，可采用预先合成的短肽片段进行液相偶联，例如通过硫酯键连接片段（如NCL技术）。

二、关键合成步骤

1、氨基酸活化与偶联

使用 HOBt、HATU、DIC 等活化试剂活化羧基，与游离氨基缩合形成肽键。例如，Fmoc-Lys(aeea-aeea-γGlu(α-OtBu)-eicosanedioic tBu ester)-OH等复杂氨基酸需分步活化。

控制反应条件（温度、pH、时间）以减少消旋化和副反应7。

2、保护基策略

Fmoc/tBu策略：氨基用Fmoc保护，侧链（如Ser、Thr的羟基）用叔丁基（tBu）保护7。

Boc/Bzl策略：适用于特定氨基酸的侧链保护。

3、裂解与粗肽制备

裂解液通常为含TFA的DCM溶液（20% TFE），裂解后通过乙醚沉淀初步纯化。

长期大量供应各种多肽固相合成树脂：如2-CTC树脂，wang树脂，Rink 酰胺树脂 AM(氨甲基树脂），Sieber 树脂等，同时供应各种多肽、重组蛋白、抗体纯化填料，纯化工艺开发。联系：15771973009（微信同）。

三、纯化工艺优化

替尔泊肽合成中杂质控制是难点，需结合先进纯化技术：

功能化硅胶分离柱：采用 3-氯丙基三乙氧基硅烷和二聚氨基氰/乙酰唑胺改性硅胶，增强对目标肽的吸附选择性，提高分离效率。

结合改性硅藻土（乙酰丙酸处理）进一步去除疏水性杂质。色谱纯化 反相高效液相色谱（RP-HPLC，C18及C8柱）及单分散聚合物反向填料Seplife RP LXMS 15(300)用于终产物的精细纯化，确保纯度>98%。

四、合成工艺的优化方向

片段设计与连接效率：优化固相合成的片段长度（如1-17和18-39）及偶联条件，减少副反应。生物合成技术：利用基因工程菌株表达替尔泊肽，结合化学合成后修饰，降低成本。分离技术升级：引入纳滤、超滤等技术简化后处理流程，提升产能。

五、产能

固拓生物：通过固相合成法实现大规模生产，工厂正在建设中，预计2026年产量可达2500kg以上。

六、挑战与前景杂质控制：固液混合法中杂质（如缺失肽、氧化产物）难以完全去除，需持续改进纯化工艺。市场竞争：礼来的替尔泊肽因化学合成路径灵活、产能充足，价格较司美格鲁肽低20%，对国内GLP-1类药物企业构成压力。适应症拓展：替尔泊肽已获批治疗阻塞性睡眠呼吸暂停，未来或扩展至心衰等领域，推动合成工艺的进一步优化。

总结

替尔泊肽的合成工艺以固液联合法为核心，结合高效活化试剂和功能化纯化技术，平衡了成本与纯度。未来，通过生物合成与化学合成的融合、新型分离材料的开发，其工艺效率和产物质量有望进一步提升，支撑其在全球糖尿病和肥胖治疗市场的持续扩张。